TIANamp Genomic DNA Kit

A-1 Baixa concentração de células ou vírus na amostra inicial - Enriqueça a concentração de células ou vírus.

A-2 Lise insuficiente das amostras —As amostras não foram bem misturadas com o tampão de lise. É sugerido misturar completamente por agitação de pulso por 1-2 vezes. —Lise celular insuficiente causada pela diminuição da atividade da proteinase K. —Lise celular insuficiente ou degradação de proteína devido ao tempo insuficiente de banho quente. Sugere-se cortar o tecido em pequenos pedaços e estender o tempo do banho para remover todo o resíduo do lisado.

A-3 Adsorção de DNA insuficiente. —Nenhum etanol ou porcentagem baixa em vez de etanol 100% foi adicionado antes do lisado ser transferido para a coluna de rotação.

A-4 O valor de pH do tampão de eluição é muito baixo. —Ajuste o pH entre 8,0-8,3.

Etanol residual no eluente.

—Há tampão de lavagem residual PW no eluente. O etanol pode ser removido centrifugando a coluna de rotação por 3-5 min e, em seguida, colocando em temperatura ambiente ou incubadora a 50 ℃ por 1-2 min.

A-1 A amostra não é fresca. - Extraia uma amostra de DNA positiva como controle para determinar se o DNA da amostra se degradou.

A-2 Pré-tratamento impróprio. —Cusado por moagem excessiva de nitrogênio líquido, recuperação de umidade ou quantidade muito grande de amostra.

Os pré-tratamentos devem variar para diferentes amostras. Para amostras de plantas, certifique-se de triturar completamente o nitrogênio líquido. Para amostras de animais, homogeneizar ou moer completamente em nitrogênio líquido. Para amostras com paredes celulares difíceis de quebrar, como bactérias G + e leveduras, sugere-se o uso de lisozima, liticase ou métodos mecânicos para quebrar as paredes celulares.

4992201/4992202 O kit Plant Genomic DNA adota um método baseado em coluna que requer clorofórmio para a extração. É especialmente adequado para várias amostras de plantas, bem como pó seco de plantas. O Hi-DNAsecure Plant Kit também é baseado em coluna, mas sem a necessidade de extração de fenol / clorofórmio, o que o torna seguro e não tóxico. É adequado para plantas com alto teor de polissacarídeos e polifenóis. 4992709/4992710 O DNAquick Plant System adota um método à base de líquido. A extração de fenol / clorofórmio também não é necessária. O procedimento de purificação é simples e rápido, sem limite para as quantidades iniciais da amostra, para que os usuários possam ajustar a quantidade de forma flexível de acordo com os requisitos experimentais. Fragmentos de gDNA de grande tamanho podem ser obtidos com alto rendimento.

O DNA genômico foi extraído de diferentes volumes de amostras de sangue total humano pelo kit TIANamp Blood DNA. Os resultados são os seguintes. Os resultados são listados apenas como referência, os resultados reais da extração dependem das condições das amostras.

A extração do DNA do coágulo sanguíneo pode ser realizada usando os reagentes fornecidos nesses dois kits, simplesmente alterando o protocolo para as instruções específicas para a extração do DNA do coágulo sanguíneo. A cópia eletrônica do protocolo de extração de DNA de coágulo sanguíneo pode ser emitida mediante solicitação.

Suspenda a amostra fresca com 1 ml de PBS, solução salina normal ou tampão TE. Homogeneizar completamente a amostra por um homogeneizador e coletar o precipitado para o fundo de um tubo por centrifugação. Descarte o sobrenadante e ressuspenda o precipitado com 200 μl de tampão GA. A seguinte purificação de DNA pode ser realizada de acordo com as instruções.

Para a purificação de gDNA em amostras de plasma, soro e fluidos corporais, o kit TIANamp Micro DNA é recomendado. Para a purificação do gDNA do vírus de amostras de soro / plasma, o kit TIANamp Virus DNA / RNA é recomendado. Para a purificação do gDNA bacteriano de amostras de soro e plasma, o TIANamp Bacteria DNA Kit é recomendado (a lisozima deve ser incluída para bactérias positivas). Para amostras de saliva, são recomendados os kits Hi-Swab DNA e TIANamp Bacteria DNA.

DNAsecure Plant Kit ou DNAquick Plant System são recomendados para extração de genoma de fungos. Para a extração do genoma da levedura, o TIANamp Yeast DNA Kit é recomendado (a liticase deve ser preparada por conta própria).