RNA Easy Fast Plant Tissue Kit
Recursos
■ Simples e rápido: a extração total de RNA de amostras de plantas pode ser concluída em 30 minutos.
■ Forte compatibilidade: este kit não é adequado apenas para amostras comuns de caule e folhas, mas também para amostras ricas em polissacarídeos / polifenóis.
■ Seguro e pouco tóxico: reagentes tóxicos como β-mercaptoetanol, DTT, clorofórmio, fenol não são necessários.
Formulários
■ Adequado para uma operação downstream, incluindo RT-PCR, RT-qPCR, hibridização de chip, Northern Blot, Dot Blot, triagem PolyA, tradução in vitro, análise de proteção RNase e clonagem molecular, etc.
Todos os produtos podem ser personalizados para ODM / OEM. Para detalhes,clique em Serviço personalizado (ODM / OEM)
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O RNA total de amostras de folhas de 65 mg (folhas de cravo, folhas de hibisco, folhas de trigo, folhas de arroz, folhas de ugli fruit, folhas de Prunus cerasifera, folhas de figo, folhas de hemerocallis, folhas de Kerria japonica), 150 mg de amostras de fungo (Lentinus edodes) e 200 Amostras de mg de pétalas (pétalas de dia-lírio) foram extraídas usando o RNA Easy Fast Plant Tissue Kit. Resultado da análise Agilent Bioanalyzer 2100 do RNA total de pétalas de dia-lírio. |
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Resultado da análise Agilent Bioanalyzer 2100 do RNA total das pétalas do lírio-dia. |
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RNA extraído de várias amostras listadas na tabela usando o kit RNA Easy Fast Plant Tissue. Volume de eluição: 50 μl; Volume de carregamento: 2 μl. A eletroforese foi conduzida a 6 V / cm por 15 min em agarose a 1%. |
A lise ou homogeneização celular A-1 não é suficiente
---- Reduza o uso de amostra, aumente a quantidade de tampão de lise, aumente a homogeneização e o tempo de lise.
A-2 Quantidade de amostra é muito grande
---- Reduza a quantidade de amostra usada ou aumente a quantidade de tampão de lise.
A-1 Lise celular insuficiente ou homogeneização
---- Reduza o uso de amostra, aumente a quantidade de tampão de lise, aumente a homogeneização e o tempo de lise.
A-2 Quantidade de amostra é muito grande
---- Consulte a capacidade máxima de processamento.
O RNA A-3 não é eluído completamente da coluna
---- Depois de adicionar água sem RNase, deixe agir por alguns minutos antes de centrifugar.
Etanol A-4 no eluente
---- Após o enxágue, centrifugue novamente e remova o tampão de lavagem tanto quanto possível.
O meio de cultura de células A-5 não foi completamente removido
---- Ao coletar células, certifique-se de remover o meio de cultura tanto quanto possível.
A-6 As células armazenadas no RNAstore não são centrifugadas de forma eficaz
---- A densidade de RNAstore é maior do que a média do meio de cultura de células; portanto, a força centrífuga deve ser aumentada. Sugere-se centrifugar a 3000x g.
A-7 Baixo conteúdo de RNA e abundância na amostra
---- Use uma amostra positiva para determinar se o baixo rendimento é causado pela amostra.
A-1 O material não é novo
---- Os tecidos frescos devem ser armazenados em nitrogênio líquido imediatamente ou colocados imediatamente no reagente RNAstore para garantir o efeito de extração.
A-2 Quantidade de amostra é muito grande
---- Reduza a quantidade de amostra.
Contaminação de A-3 RNasen
---- Embora o tampão fornecido no kit não contenha RNase, é fácil contaminar RNase durante o processo de extração e deve ser manuseado com cuidado.
Poluição por eletroforese A-4
---- Substitua o tampão de eletroforese e certifique-se de que os consumíveis e o tampão de carregamento estejam livres de contaminação por RNase.
A-5 Carregamento demais para eletroforese
---- Reduza a quantidade de carregamento de amostra, o carregamento de cada poço não deve exceder 2 μg.
A quantidade de amostra A-1 é muito grande
---- Reduza a quantidade de amostra.
A-2 Algumas amostras têm alto conteúdo de DNA e podem ser tratadas com DNase.
---- Realize o tratamento com RNase-Free DNase para a solução de RNA obtida, e o RNA pode ser usado diretamente para experimentos subsequentes após o tratamento, ou pode ser posteriormente purificado por kits de purificação de RNA.
Para vidrarias, cozido a 150 ° C por 4 h. Para recipientes de plástico, imerso em NaOH 0,5 M por 10 min, em seguida, enxágue completamente com água sem RNase e, em seguida, esterilize para remover completamente a RNase. Os reagentes ou soluções utilizados no experimento, principalmente água, devem estar isentos de RNase. Use água sem RNase para todas as preparações de reagentes (adicione água a um frasco de vidro limpo, adicione DEPC a uma concentração final de 0,1% (V / V), agite durante a noite e autoclave).
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